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AMPPD講述AMPPD在實(shí)際中的使用步驟
1】臨用前,取適量的A1和A2,等量混合后獲得Dioxetane Buffer。
2】按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即為AMPPD Dioxetane Buffer(發(fā)色發(fā)光顯跡液),用于膜的染色。
3】取適量Dioxetane Buffer洗膜兩次,每次15min。
4】對(duì)于PVDF膜進(jìn)行的堿性磷酸酶反應(yīng), 膜置于新鮮配制的AMPPD Dioxetane Buffer作用5min。
5】將膜移入適量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡5min(AP反應(yīng))。
6】取出PVDF膜,滴干水分,將膜正面朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上,向后折疊將膜包裹起來(lái),成為不漏水的封閉體。
7】在暗房中,將膜正面朝下放在感光膠片上,曝光數(shù)秒至數(shù)小時(shí)。
8】如需要,在室溫下以適量的TBS洗膜15min。
9】將膜放入
AMPPD Dioxetane Buffer,條帶應(yīng)在10~30min內(nèi)出現(xiàn)。
10】用蒸餾水洗膜,終止反應(yīng)。晾干后拍照留永久的記錄。
廣東佰圣特生物科技有限公司主營(yíng)產(chǎn)品:
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