根據(jù)取代基的不同，常用作化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物的吖啶取代物分為兩類:吖啶酯和吖啶磺酰胺。它們的結(jié)構(gòu)中都有共同的吖啶環(huán)。 它們的發(fā)光機(jī)理相同:在堿性H2O2 溶液中， 分子受到過(guò)氧化氫離子進(jìn)攻時(shí)， 生成不穩(wěn)定的二氧乙烷， 此二氧乙烷分解為CO2 和電子激發(fā)態(tài)的N - 甲基吖啶酮， 當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)發(fā)出最大發(fā)射波長(zhǎng)為430nm 的光子。吖啶酯這類化合物從發(fā)光的機(jī)理來(lái)說(shuō)特點(diǎn)是: ①發(fā)光反應(yīng)中在形成電子激發(fā)態(tài)中間體之前， 聯(lián)結(jié)于吖啶環(huán)上的不發(fā)光的取代基部分從吖啶環(huán)上脫離開來(lái)， 即未發(fā)光部分與發(fā)光部分分離， 因而其發(fā)光效率基本不受取代基結(jié)構(gòu)的影響。②吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物化學(xué)發(fā)光不需要催化劑， 在有H2O2 的稀堿性溶液中即能發(fā)光。       因此應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)具有許多優(yōu)越性。吖啶酯優(yōu)點(diǎn)主要有:①背景發(fā)光低，信噪比高;②發(fā)光反應(yīng) 干擾因素少;③光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強(qiáng)度大;④ 易于與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少;⑤標(biāo)記物穩(wěn)定( 在2 - 8 ℃下可保存數(shù)月之久)。因此吖啶酯或吖啶磺酰胺是一類非常有效、非常好的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。
       這類化合物的發(fā)光為閃光型，加入發(fā)光啟動(dòng)試劑后0. 4s 左右發(fā)射光強(qiáng)度達(dá)到最大， 半衰期為0. 9s 左右。
       吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)，通常采用的體系是Acridinium ester/ H2O2 系統(tǒng)。 即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標(biāo)記抗體或抗原， 用HNO3+ H2O2 和NaOH 作發(fā)光啟動(dòng)試劑。有些在發(fā)光啟動(dòng)試劑中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性劑以增強(qiáng)發(fā)光。
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