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AMPPD簡(jiǎn)述堿性磷酸酶(ALP)的發(fā)光體系,堿性磷酸酶(ALP)分子質(zhì)量小、穩(wěn)定性好、活性高、易分離提純,已廣泛用于酶聯(lián)免疫分析和核酸雜交析。堿性磷酸酶和1,2-二氧環(huán)乙烷構(gòu)成的發(fā)光體系是目前最重要、最靈敏的一類(lèi)化學(xué)發(fā)光體系。這類(lèi)體系中具有代表性的是Bronstein等提出的ALP-AMPPD發(fā)光體系。在溶液中AMPPD的磷酸酯鍵很穩(wěn)定,非酶催化的水解非常慢,在pH12、0.05mol/L碳酸鈉緩沖溶液中,分解半衰期可達(dá)74年,幾乎沒(méi)有試劑本身的發(fā)光背景。AMPPD為磷酸酯酶的直接發(fā)光底物,可用來(lái)檢測(cè)堿性磷酸酶或抗體、核酸探針及其他配基的結(jié)合物。
ALP-AMP-PD發(fā)光體系具有非常高的靈敏度,無(wú)論是固相還是液相檢測(cè),對(duì)標(biāo)記物ALP的檢測(cè)限達(dá)10mol~21mol,是最靈敏的免疫測(cè)定方法之一。對(duì)
AMPPD加以改進(jìn),獲得具有更好反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和更高靈敏度的新一代產(chǎn)物CSPD和CDP-Star。這些體系已廣泛用于各種基因、病原體DNA的鑒定。
另外,在堿性磷酸酶(ALP)方面,新的發(fā)光體系A(chǔ)PS 5(也有些寫(xiě)為APS-5)在普及中,APS 5被稱(chēng)為超高靈敏度檢測(cè)試劑,其靈敏度、發(fā)光時(shí)間、發(fā)光強(qiáng)度等都超越了
AMPPD,但其穩(wěn)定性差,適用溫度偏低。目前還有新型的發(fā)光試劑PS-3(2005年)性能比APS-5還要高。
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